双缩脲试剂(双缩脲试剂需要现配现用吗)
一、双缩脲试剂与双缩脲之间有什么区别
简单的说双缩脲是一种化学物质,而检测蛋白是用的那两个试剂之所以叫双缩脲是因为检测原理和双缩脲的形成相似。
二、双缩脲试剂的使用方法
双缩脲试剂A是质量分数为0.1 g/mL的NaOH水溶液;
双缩脲试剂B是质量分数为0.01 g/mL的CuSO4水溶液.
先在待测液中加入双缩脲试剂A 3mL,振荡均匀(营造碱性环境),再加入1~2滴双缩脲试剂B,振荡均匀。如果待测液里含有蛋白质,那么会看到溶液变成紫色。具有两个或两个以上肽键的化合物皆可与双缩脲试剂产生紫色反应。
蛋白质的肽键在碱性溶液中能与Cu2+络合成紫色的络合物。颜色深浅与蛋白质浓度成正比。
扩展资料
鉴定生物组织中是否含有蛋白质时,使用的是双缩脲试剂,发生的是双缩脲反应。双缩脲反应实质是在碱性环境下Cu2+的与双缩脲试剂发生的紫色反应。
而蛋白质分子中含有很多与双缩脲(H2NOC-NH-CONHH2)结构相似的肽键,所以蛋白质都能与双缩脲试剂发生紫色反应,可以用双缩脲试剂鉴定蛋白质的存在。
参考资料来源:百度百科-双缩脲试剂
三、双缩脲试剂是什么
蛋白质用双缩脲试剂鉴定.双缩脲试剂是由甲液:NaOH和乙液:CuSO4组成
取10 g氢氧化钠放入量筒中,加水至100 mL,待充分溶解后倒入试剂瓶中,配成质量浓度为0.1 g/mL的氢氧化钠溶液,瓶口塞上胶塞,贴上标签,写上试剂A.
取1 g硫酸铜放入量筒中,加水至100 mL,待充分溶解后倒入试剂瓶中,配成质量浓度为0.01 g/mL的硫酸铜溶液(蓝色).瓶口塞上胶塞,贴上标签,写上试剂B.
A、B混合.
四、双缩脲试剂 怎么配
碱性条件下,双缩脲h2n-co-nh-co-nh2可以和cu离子作用生成紫色沉淀。
灵敏度差,测定范围窄,样品需要量大,不同的蛋白质产生颜色的深浅相近,因此它常用于需要快速,但并不需要十分精确的蛋白质测定。干扰测定的物质包括有:在性质上是氨基酸或肽的缓冲液,如TrIs缓冲液,因为它们产生阳性呈色反应,铜离子也容易被还原,有时出现红色沉淀。
配制:
双缩脲试剂A是质量分数为0.1 g/mL的NaOH水溶液;双缩脲试剂B是质量分数为0.01 g/mL的CuSO4水溶液。
先在待测液中加入双缩脲试剂A 3mL,振荡均匀(营造碱性环境),再加入1~2滴双缩脲试剂B,振荡均匀。如果待测液里含有蛋白质,那么会看到溶液变成紫色。
具有两个或两个以上肽键的化合物皆可与双缩脲试剂产生紫色反应。蛋白质的肽键在碱性溶液中能与Cu2+络合成紫色的络合物。颜色深浅与蛋白质浓度成正比。
以上内容参考:百度百科-双缩脲试剂
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