获得目的基因的三种方法(什么是基因工程)
一、简述基因工程的概念和步骤。
【答案】:基因工程又可称为DNA重组、分子克隆、基因操作等,是按照工程设计的方法,根据预先没计的蓝图,采用分子生物学、核酸生物化学以及微生物遗传学的现代方法和手段。实现DNA的人工重组。这种DNA重组主要是指创造自然界中没有的DNA分子的新组合。基因工程术主要包括以下步骤:
(1)获得目的基因;
(2)基因表达载体的构建;
(3)进行遗传转化,将表达载体与DNA片段构成的重组DNA分子导入宿主细胞;
(4)转化体的筛选;
(5)转化体的遗传鉴定,即重组DNA能随宿主细胞的分裂而分配到子细胞,使子代群体细胞均具有重组DNA分子的拷贝。并且能转录成mRNA、翻译成蛋白质。能分离、鉴定基因产物。
二、什么是基因工程
基因工程(geneticengineering),也叫基因操作、遗传工程,或重新组体DNA技术。它是一项将生物的某个基因通过基本载体运送到另一种生物的活性细胞中,并使之无性繁殖(称之为“克隆”)和行使正常功能(称之为“表达”),从而创造生物新品种或新物种的遗传学技术。一般说来,基因工程是专指用生物化学的方法,在体外将各种来源的遗传物质(同源的或异源的、原核的或真核的、天然的或人工合成的DNA片段)与载体系统(病毒、细菌质粒或噬菌体)的DNA组合成一个复制子。这样形成的杂合分子可以在复制子所在的宿主生物或细胞中复制,继而通过转化或转染宿主细胞、生长和筛选转化子,无性繁殖使之成为克隆。然后直接利用转化子,或者将克隆的分子自转化子分离后再导入适当的表达体系,使重组基因在细胞内表达,产生特定的基因产物。
基因工程中内外源DNA插入载体分子所形成的杂合分子又称为分子嵌合DNA或DNA嵌合体(DNAchimera)。构建这类重组体分子的过程,即对重组体分子的无性繁殖过程又称为分子克隆(molecularcloning),基因克隆(genecloning)或重组DNA(recombinantDNA)。
在典型的基因工程实验中,被操作的基因不仅能够克隆,而且能够表达。但是在另外一种情况下,为了制备和纯化一段DNA序列,我们只需这一段DNA在受体细胞中克隆就可以了,无需让它表达,这也是一种基因工程实验。
三、生物基因工程的概念具体是什么
1、生物基因工程(geneticengineering)又称基因拼接技术和DNA重组技术,是以分子遗传学为理论基础,以分子生物学和微生物学的现代方法为手段,将不同来源的基因按预先设计的蓝图,在体外构建杂种DNA分子,然后导入活细胞,以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品的遗传技术。
2、基因工程技术为基因的结构和功能的研究提供了有力的手段。
四、植物基因工程的概念
用人工的方法,从不同生物中提取外源基因片段及载体DNA,经过体外切割、拼接和重组,然后采取某种方法,把重组后的带有外源基因的载体DNA引入植物细胞,并使其在植物细胞内进行复制和表达,以达到预期的改变受体植物细胞遗传特性的目的.此种过程即称为植物基因工程.已知土壤中的根癌农杆菌(Agrobacteriwmtemefaciens)的Ti质粒和发根农杆菌(A.rhizogenes)的Ri质粒是转移外源基因片段的理想载体DNA.目的基因的Ti质粒或Ri质粒的重组体通过细菌或微粒枪射法,能转移到多数双子叶植物体内,并便受体植物表现出目的基因所控制的遗传特性.利用上述方法,目前已培养出一批具有抗虫、抗病毒或抗除草剂特性的作物“工程株”;但重组体进入水稻、小麦、玉米等单子叶植物还有困难,尚须加紧研究.
GOOGLE英文翻译:Artificial method of extraction from different biological exogenous gene fragment and vector DNA, through in vitro cutting, splicing and reorganization, and then take some kind of a way to separate the reorganized carrier with a foreign gene DNA into plant cells, and to its replication in plant cells and expression in order to achieve the desired change in the genetic characteristics of plant cell receptors purpose. this process is referred to as plant genetic engineering. known to the soil Agrobacterium tumefaciens(Agrobacteriwmtemefaciens) of the Ti plasmid, and Agrobacterium rhizogenes(A.rhizogenes) of the Ri plasmid is to transfer the foreign gene fragment an ideal vector DNA. The purpose of the Ti plasmid gene or a Ri plasmid of recombinant bacteria or particles was shot by law, can be transferred to the majority of dicotyledonous plants, and plants have shown receptor gene under the control of inherited characteristics. Using this method, has cultivated a group of insect-resistant, anti-virus or anti-crop herbicide characteristics of engineering strain; But the reorganization of body into the rice, wheat, corn and other monocots, there are still difficulties, it would need to step up research.