细胞培养一般方法有哪些

一、细胞培养的特点

1、能长期传代，保持活性，便于监控检测结构功能和生命活动。

2、培养条件可以人为的控制便于研究细胞代谢、物理、化学、生物因素的影响

3、可用于各种观察和检测手段研究活细胞的变化（变异、分化）。可从细胞水平开展亚细胞结构和代谢分子的表达。

4、研究范围和细胞来源广泛，选择性广。

5、不同代次细胞可长期保存，既可开展同代次不同条件和方法研究，又可观察不同代次的动态变化。

6、耗资少、经济、成本低、可大量培养，利于生物制品的生产。

二、细胞培养一般方法有哪些

细胞培养首先分为原代培养和传代培养.

一、原代培养需要从组织中消化、分离、纯化出单细胞,然后继续进行传代、冻存；

二、传代培养首先进行细胞复苏:

1.应遵守慢冻快融的原则.先将水温锅调至37-38度,取出冻存的细胞迅速放入后交细胞面浸至水面以下不断摇动至融化.

2.在无菌台内将完全培养基加入培养瓶内,然后用无菌吸管从冻存管内取出细胞,置培养瓶内轻轻摇晃,使细胞均匀后置培养箱内培养,24h后换液；也可复苏当时离心（1000rpm 5min左右）后,完全培养基重悬培养,适时换液.

细胞传代:

1.贴壁细胞:

对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基,吸的越干净越好,以免中和后加入的消化液,使强度减弱.PBS清洗2-3次,去除血清和死细胞,50ml培养瓶加入消化液约0.6ml,按此比例进行消化,(根据配制强度经验),晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2分钟,镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后,轻轻振动瓶底使细胞全部脱落,加入2-3ml完全培养基后,轻轻吹打,使细胞基本成单个悬浮,然后收集离心（1000rpm 5min左右）,新鲜培养基重悬沉淀,加入完全培养基后继续培养或实验.

2.悬浮细胞:

一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内,加入完全培养基继续培养,如要高浓度或需更换新培养基,可先离心（1000rpm,5min左右）后加入完全培养基,轻轻吹匀后,分置其它培养瓶内加入完全培养基继续培养.

三、细胞培养的意义

⒈可以进行植物体外受精及植物胚胎发育过程研究。

⒉可以进行植物生长发育有关的重要基因或影响因素的研究。

⒊可以方便地通过实验手段培育植物新品种。

四、名词解释,细胞培养

细胞培养是指从体内组织取出细胞摹拟体内出现环境，在无菌、适当温度及酸碱度和一定营养条件下，使期生长繁殖，并维持其结构和功能的一种培养技术。